Специальные Процедуры

Криоконсервация эмбрионов (Cryopreservation)

\n

В цикле ЭКО, после переноса пациентке качественных эмбрионов, оставшиеся качественные эмбрионы по желанию супружеской пары могут быть заморожены и сохранены для использования в последующих попытках. В Турции по закону эмбрионы могут храниться в жидком азоте в течение 5 лет. Возможность криохранения эмбрионов предоставляет пациентке материальное и моральное преимущество. Если в данной процедуре беременность не наступает или завершается выкидышем, либо если пара хочет вновь иметь ребенка после родов, то при следующей процедуре ЭКО стимуляция яичников и забор яйцеклеток повторно не проводятся: эмбрионы размораживаются, и выполняется только перенос эмбрионов.

\n

Иногда по медицинским показаниям эмбрионы может потребоваться заморозить и отложить перенос. Если в период, когда должен проводиться перенос эмбрионов, у женщины возникает какое-либо заболевание, операция и т. п., перенос может быть отложен, а эмбрионы заморожены. Если слои, выстилающие внутреннюю стенку матки, недостаточно созревают и становятся тонкими, либо во время лечения у женщины возникает синдром гиперстимуляции яичников (OHSS), вызванный чрезмерной стимуляцией яичников, эмбрионы могут быть заморожены, а перенос эмбрионов выполнен в период, когда эти проблемы устранены. Также, если в полости матки обнаруживаются полипы, миомы, спайки и т. п. проблемы во время лечения, эмбрионы замораживаются, и после устранения этих проблем хирургическим лечением выполняется перенос эмбрионов. Для замораживания эмбрионов существуют 2 различных метода. Это: медленное контролируемое замораживание и более новый метод — витрификация. Наиболее существенное различие между медленным контролируемым замораживанием и витрификацией — механизм сохранения структурной целостности клетки. При методе медленного замораживания жизнеспособность клетки обеспечивается образованием кристаллов льда вокруг клетки в процессе постепенного охлаждения, тогда как при методе витрификации с помощью растворов для замораживания высокой концентрации при резком падении температуры вокруг клетки образуется стеклообразная твердая поверхность, и таким образом предпринимается попытка её сохранить. Эмбрионы могут быть заморожены на всех стадиях развития. Эмбрионы уравновешиваются защитной жидкостью (криопротектантом), помещаются в специальные пластиковые контейнеры и замораживаются в жидком азоте при температуре -196 градусов. Хранятся в специальных резервуарах, где для каждой пациентки предусмотрены отдельные места хранения. При размораживании замороженных эмбрионов их извлекают из жидкого азота, отделяют от защитной жидкости, помещают в специальную культуральную среду и ставят в инкубатор. Эмбрионы, которые хорошо выглядят в тот же день или на следующий день, могут быть перенесены. Поскольку эмбрионы чувствительны к процедуре замораживания, у всех замороженных эмбрионов после размораживания жизнеспособность может быть не одинаковой. Ожидаемый процент жизнеспособности при хорошей программе замораживания составляет 75–80%. Показатели клинической беременности и живорождения, полученные при переносе размороженных эмбрионов, близки к показателям, полученным при переносе свежих эмбрионов.

\n

Хранение яйцеклеток в замороженном виде

\n

Хранение яйцеклеток в замороженном виде по сравнению с другими методами ЭКО является новым и экспериментальным методом. Наиболее важным фактором, влияющим на успех, является высокая вероятность потери жизнеспособности яйцеклеток в процессе замораживания и размораживания. Яйцеклетка человека содержит большое количество воды. В процессе замораживания могут образовываться кристаллы льда, которые повреждают клетку и могут снизить жизнеспособность яйцеклетки и шанс её оплодотворения. По медицинским показаниям яйцеклетки могут быть заморожены без оплодотворения спермой для использования в более отдаленные сроки. Эти медицинские показания указаны в Регламенте Министерства здравоохранения. У женщин, не состоящих в браке, яйцеклетки могут быть заморожены по медицинским показаниям до начала курсов лечения онкологических заболеваний, при которых риск бесплодия высок. Если женщина состоит в браке до начала онкологического лечения, предпочтительнее замораживание эмбрионов, а не яйцеклеток, поскольку это связано с более высокой эффективностью.

\n

Ассистированный хетчинг (Assisted Hatching)

\n

Это процедура частичного истончения наружной оболочки (zona pellucida) переносимых эмбрионов под микроскопом механическим способом, с помощью кислоты или лазера. Считается, что это облегчает прикрепление эмбриона к стенке матки.

\n

Применяется у пациенток старшего возраста, при эмбрионах с толстой оболочкой или у пациенток, у которых в предыдущих процедурах были проблемы с прикреплением (имплантацией) к стенке матки. В нашей клинике эта процедура выполняется с помощью современного лазерного аппарата.

\n

IMSI (Интрацитоплазматическая инъекция морфологически отобранных сперматозоидов)

\n

Интрацитоплазматическая инъекция морфологически отобранного сперматозоида (IMSI) — метод, который по сравнению с традиционными микроскопами для ЭКО/ИКСИ с помощью специальных методов увеличения позволяет на высоком уровне исследовать морфологический анализ сперматозоидов. При стандартных процедурах ИКСИ живой сперматозоид можно увеличить максимум в 400 раз и изучить общие морфологические особенности сперматозоида (структуру головки, шейки и хвоста). Однако органеллы и вакуоли, а также другие структуры, которых не должно быть в головке сперматозоида, и клеточное ядро исследовать нельзя. При IMSI используемые увеличения превышают 6000 раз, что позволяет отбирать морфологически лучшие сперматозоиды. У живых сперматозоидов детально исследуются внутриклеточные структуры и морфология клеточного ядра. Таким образом, после детального отбора нормальных или максимально близких к норме сперматозоидов с помощью микроинъекции удается добиться более высокого уровня оплодотворения. Благодаря этому усовершенствованному методу можно выявить некоторые внутриклеточные структуры сперматозоида, например вакуоли (полости, окруженные мембраной), которые, как известно, нарушают стабилизацию хроматина. Отбираются сперматозоиды, не имеющие этих дефектов или имеющие минимальные дефекты, обладающие более высокой способностью к оплодотворению, и выполняется ИКСИ (микроинъекция). Применение метода IMSI требует больше времени и хорошо обученного персонала по сравнению с традиционной ИКСИ и приводит к более высокой стоимости.

\n

Кому следует проводить IMSI?

\n

• Особенно в случаях тяжелого мужского фактора бесплодия,
• При повторных неудачах ЭКО,
• При бесплодии неясной причины,
• В случаях, когда доля нормальных сперматозоидов в образце спермы низкая, применение IMSI может повысить уровень имплантации и наступления беременности и снизить риск раннего выкидыша.

\n

PGT (Преимплантационное генетическое тестирование)

\n

Наличие генетического заболевания у ребенка, развивающегося в утробе матери, может быть выявлено с помощью тестов, проводимых начиная с 12-й недели беременности. Однако если эти тесты выявляют серьезное заболевание, беременность необходимо прервать на поздних сроках (примерно на 5-м месяце). Это приводит к психологическому и физическому истощению пары. Между тем при преимплантационной генетической диагностике (PGT) эмбрионы с генетическим заболеванием могут быть выявлены до переноса в организм матери, то есть до начала беременности, и определяются эмбрионы, которые могут иметь количественные или структурные нарушения хромосом. Таким образом, переносятся только здоровые эмбрионы. Даже если эмбрионы по форме и строению выглядят нормально, из-за аномалий хромосом беременность может не развиться или развившаяся беременность может закончиться выкидышем. В проведенных исследованиях хромосомные нарушения выявлялись у эмбрионов хорошего качества в 35–40% случаев, а у эмбрионов плохого качества — в 85–90%. Врач-репродуктолог, генетический консультант и врач соответствующего заболевания оценивают, подходит ли пациентка для PGD. Пара готовится к процедуре ЭКО. Яйцеклетка, полученная от матери, оплодотворяется спермой, полученной от отца, в лабораторных условиях. Когда делящиеся эмбрионы на 3-й день достигают стадии 6–10 клеток, их сначала выдерживают в специальной жидкости, подготовленной для разделения клеток, а затем под микроскопом с помощью подходящей техники из каждого эмбриона извлекают 1–2 клетки. Полученные биопсией клетки нумеруются, после фиксации применяются специальные методы, такие как флуоресцентная гибридизация in situ (FISH) или полимеразная цепная реакция (PCR), которые позволяют исследовать хромосомы под микроскопом. Эмбрионы с количественными или структурными нарушениями хромосом выявляются и отделяются; здоровые эмбрионы переносятся в матку будущей матери. Случаи, в которых будет применяться эта методика, необходимо отбирать с особой тщательностью.

\n

Генетические заболевания, выявляемые методом PGT

\n

• Синдром Дауна (моносомия 21)
• Трисомии
• Талассемия (средиземноморская анемия),
• Серповидноклеточная анемия,
• Муковисцидоз,
• Болезнь Тея-Сакса,
• Гемофилия A и B,
• Пигментный ретинит,
• Синдром Альпорта,
• Дефицит α1-антитрипсина,
• Синдром ломкой X-хромосомы,
• Фенилкетонурия,
• Буллезный эпидермолиз,
• Мышечная дистрофия Дюшенна,
• Миотоническая дистрофия,
• Анемия Фанкони,
• Гидроцефалия, связанная с X-хромосомой,
• Ахондроплазия,
• Нейрофиброматоз,
• Резус-конфликт (болезнь Rh D),
• Синдром Марфана,
• Болезнь Хантингтона.

\n

Метаболомика

\n

В настоящее время переносимые эмбрионы оценивают под микроскопом, и по количеству клеток и их формальным характеристикам отбирается лучший эмбрион, имеющий наибольшую вероятность прикрепления к стенке матки. Однако хорошее качество эмбриона недостаточно, чтобы установить, что эмбрион нормален с точки зрения генетических и метаболических процессов. Оценить, является ли эмбрион хромосомно (генетически) нормальным, можно только путем исследования одной или двух клеток, взятых биопсией, методом преимплантационной генетической диагностики (PGT). Однако для применения этого метода необходимы обоснованные показания, такие как возраст матери старше допустимого, носительство генетического заболевания, повторные потери беременности, неудачные процедуры, тяжелый мужской фактор бесплодия. Считается, что, так же как по анализам крови и мочи человека можно получить сведения о состоянии здоровья, изучая метаболизм эмбрионов, то есть какие вещества они потребляют из питательной среды и что выделяют в окружающую среду, можно получить сведения о состоянии их здоровья и оценить шанс наступления беременности. Новый разработанный метод называется «Metabolomics». Этот метод, еще не вошедший в рутинную практику и находящийся на стадии изучения эффективности, не имеет преимущества в виде повышения способности эмбриона прикрепляться. Не доказано, что он повышает уровень наступления беременности.

\n

Эндометриальная ко-культура (искусственная матка)

\n

У пар с повторными неудачами ЭКО и с повторно медленным развитием и/или плохим качеством эмбрионов считается, что культивирование эмбрионов на клетках эндометрия из полости матки, взятых у будущей матери и сохраненных в замороженном виде до начала лечения, может дать результат. На 21-й день менструального цикла из полости матки берется небольшой образец ткани, который в лабораторных условиях разделяется; создается культуральная среда с использованием инактивированной и профильтрованной сыворотки, полученной из собственной крови пациентки, и необходимые клетки размножаются (это занимает от 1 до 3 недель). Если лечение планируется в следующем менструальном цикле, культивирование продолжается. Если планируется более отдаленная дата, развившиеся клетки замораживаются и сохраняются. Затем пациентка направляется на лечение ЭКО. При проведении забора яйцеклеток замороженные образцы размораживаются. Создается так называемая искусственная внутриматочная ткань для ко-культуры. После проведения ЭКО и наступления оплодотворения образовавшиеся эмбрионы выращиваются в этой ткани до переноса. Поскольку культуральные среды, разработанные в последние годы, создают очень подходящую питательную среду для эмбрионов, а применение ко-культуры существенно не повышает шанс наступления беременности, большинство центров не предпочитают этот метод, поскольку он связан с рисками.

\n

Лимфоцитарная вакцинация

\n

При бесплодии неизвестной причины или при повторных потерях беременности считается возможным, что у матери может возникнуть аллергическая реакция отторжения на клетки отца. Для лечения этой реакции лимфоциты, взятые у отца и прошедшие различные процедуры, вводятся матери в виде вакцины. Эффективность не была подтверждена в научных контролируемых исследованиях.

\n

Embriyo Glue (Клей для эмбрионов)

\n

Эта культуральная жидкость — жидкость, которая содержится в катетере, где находятся эмбрионы при их переносе в полость матки, и которая переносит эмбрионы в полость матки. Особенность этой жидкости в том, что она содержит в высокой концентрации (0,5 мг/мл) вещество гликопротеиновой структуры под названием «гиалуронан». Гиалуронан — вещество, которое играет роль в определении межклеточных связей и характерных особенностей тканей. Хотя точная роль этого вещества во взаимодействии эмбриона и эндометрия не до конца известна, считается, что добавление его в культуральную жидкость для переноса повышает шанс прикрепления эмбрионов в полости матки. Приклеивание эмбриона не является техникой или процедурой. Эмбрион, не обладающий потенциалом прикрепления, не может быть прикреплен к внутренней стенке матки какой-либо процедурой или веществом. По результатам проведенных исследований не получено данных о том, что эта жидкость повышает шанс наступления беременности.

\n

IVM (Созревание in vitro)

\n

Незрелые яйцеклетки, полученные после краткосрочного приема препаратов или без приема каких-либо препаратов, созревают в лабораторных условиях в специальных культуральных средах, после чего проводится микроинъекция. Это процедура, которая может применяться к определенной выбранной группе пациентов и успешность которой ниже, чем у стандартных процедур ЭКО.