Procedura Speciale

Ngrirja e embrionit (Cryopreservation)

Në ciklin ku kryhet fekondimi in vitro (IVF), embrionet e cilësisë së lartë që mbeten pas transferimit të embrioneve të cilësisë së lartë te pacienti mund të ngrihen dhe të ruhen, sipas kërkesës së çiftit, për t'u përdorur në tentativat e mëvonshme. Në Turqi, sipas ligjit, embrionet mund të ruhen në azot të lëngët për 5 vjet. Ruajtja e embrioneve me ngrirje i sjell pacientit avantazh material dhe moral. Nëse në këtë aplikim nuk arrihet shtatzënia, ose ajo përfundon me abort spontan, ose nëse çifti dëshiron të ketë përsëri një fëmijë pas lindjes, në procedurën e ardhshme të fekondimit in vitro embrionet shkrihen dhe kryhet vetëm procedura e transferimit të embrionit, pa nevojë për stimulimin e sërishëm të vezoreve dhe marrjen e vezëve.

Ndonjëherë, për shkak të një nevoje mjekësore, mund të jetë e nevojshme që embrionet të ngrihen dhe transferimi të shtyhet. Nëse në periudhën kur embrionet do të transferoheshin shfaqet te gruaja ndonjë sëmundje, operacion ose situatë tjetër, transferimi mund të shtyhet dhe embrionet të ngrihen. Nëse shtresat që mbulojnë murin e brendshëm të mitrës nuk piqen mjaftueshëm dhe mbeten të holla, ose nëse gjatë trajtimit shfaqet hiperstimulimi i vezoreve të gruas i shkaktuar nga stimulimi i tepërt (OHSS), embrionet mund të ngrihen dhe transferimi i embrionit mund të kryhet në një periudhë kur këto probleme janë zgjidhur. Gjithashtu, nëse gjatë trajtimit vërehen polipe, miome, aderenca ose probleme të tjera që zënë vend brenda mitrës, embrionet mund të ngrihen dhe transferimi kryhet pasi këto probleme të jenë zgjidhur me trajtim kirurgjik. Për ngrirjen e embrioneve ekzistojnë 2 teknika të ndryshme. Këto janë;Ngrirja e ngadaltë e kontrolluar dhe metoda më e re, vitrifikimi. Ndryshimi më themelor midis ngrirjes së ngadaltë të kontrolluar dhe teknikës së vitrifikimit është mekanizmi i ruajtjes së integritetit strukturor të qelizës. Në metodën e ngrirjes së ngadaltë, jetëgjatësia e qelizës sigurohet duke krijuar kristale akulli rreth qelizës gjatë ftohjes graduale, ndërsa në teknikën e vitrifikimit përpiqemi ta ruajmë qelizën duke krijuar, me ndihmën e tretësirave ngrirëse me përqendrim të lartë, një sipërfaqe të ngurtë, si xhami, rreth qelizës, së bashku me rënien e befasishme të temperaturës. Embrionet mund të ngrihen në të gjitha fazat e zhvillimit. Embrionet ekuilibrohen me një lëng mbrojtës (krioprotektant), vendosen në mbajtëse të veçanta plastike dhe ngrihen në azot të lëngët në -196 gradë. Ruhen në tanke të veçanta, me vende ruajtjeje të ndara për çdo pacient. Kur embrionet e ngrira duhet të shkrihen, nxirren nga azoti i lëngët, ndahen nga lëngu mbrojtës, vendosen në një mjedis të veçantë kulture dhe futen në inkubator. Embrionet që duken mirë të të njëjtën ditë ose ditën tjetër mund të transferohen. Meqenëse embrionet janë të ndjeshëm ndaj procesit të ngrirjes, nuk është e mundur që të gjithë embrionet e ngrira të kenë të njëjtën jetëgjatësi kur shkrihen. Norma e pritshme e jetëgjatësisë nga një program i mirë ngrirjeje është 75–80%. Norma e shtatzënisë klinike dhe e lindjeve të gjalla të arritura me transferimin e embrioneve të ngrira dhe të shkrira është afër normave të arritura me transferimet e embrioneve të freskëta.

Ruajtja e vezëve me ngrirje

Ruajtja e vezës me ngrirje është një teknikë e re dhe eksperimentale krahasuar me trajtimet e tjera të IVF. Faktori më i rëndësishëm që ndikon në suksesin është probabiliteti i lartë që vezët të humbin jetëgjatësinë gjatë procesit të ngrirjes dhe shkrirjes. Vezët njerëzore përmbajnë përqindje të lartë uji. Gjatë procesit të ngrirjes mund të formohen kristale akulli që dëmtojnë qelizën dhe mund të pengojnë jetëgjatësinë dhe shansin e fekondimit të vezës. Në rast nevoje mjekësore, vezët mund të ngrihen pa u fekonduar me spermë, për t'u përdorur në vitet e ardhshme. Këto raste të nevojës mjekësore përcaktohen në Rregulloren e Ministrisë së Shëndetësisë. Te gratë që nuk janë të martuara, vezët mund të ngrihen para trajtimeve kanceroze me rrezik të lartë për pasuri, për shkak të nevojës mjekësore. Nëse gruaja është e martuar para trajtimit kancerogjen, preferohet ngrirja e embrionit në vend të ngrirjes së vezës, për shkak të suksesit më të lartë.

Hapja e asistuar e embrionit (Assisted Hatching)

Është procedura e hollimit të pjesshëm, nën mikroskop, mekanikisht, me acid ose me lazer, të membranës më të jashtme (zona pellucida) të embrioneve që do të transferohen. Mendohet se kjo e lehtëson ngjitjen e embrionit në murin e mitrës.

Zbatohet te pacientet në moshë të avancuar, te embrionet me mur të trashë ose te pacientet që kanë pasur më parë probleme me ngjitjen (implantimin) në mitër. Në spitalin tonë, kjo procedurë kryhet me pajisjen me lazer, e teknologjisë së fundit.

IMSI (Injeksioni intra-citoplazmatik i spermatozoidit të zgjedhur sipas morfologjisë)

IMSI (injeksioni i spermës i zgjedhur sipas morfologjisë intra-citoplazmatike) është një metodë që, krahasuar me mikroskopët e zakonshëm të IVF/ICSI, lejon analizën e morfologjisë së spermatozoideve në nivel të lartë, duke përdorur teknika të veçanta zmadhimi. Në aplikimet standarde të ICSI, spermatozoidi i gjallë mund të zmadhohet deri në 400 herë, për të shqyrtuar karakteristikat e përgjithshme morfologjike të spermës (struktura e kokës-qafës-bishtit). Por nuk mund të shqyrtohen strukturat që nuk duhet të ekzistojnë në kokën e spermatozoidit, si organelet dhe vakuolet, si dhe bërthama qelizore. Zmadhimet e përdorura në IMSI kalojnë 6000 herë dhe mundësojnë zgjedhjen e spermatozoideve më të mirë morfologjikisht. Te spermatozoidet e gjallë shqyrtohen në detaje strukturat brenda qelizës dhe morfologjia e bërthamës. Kështu, përmes zgjedhjes së detajuar të spermatozoideve normale ose më afër normales, dhe mikroinjeksionit të kryer pas kësaj, mund të arrihet fekondim më i lartë. Me anë të kësaj metode të avancuar, mund të identifikohen disa struktura brenda qelizës, si vakuolet (hapësira të rrethuara me membranë), të cilat gjenden në qelizën e spermës dhe njihen se prishin stabilizimin e kromatinës; spermatozoidet që nuk i shfaqin këto defekte ose shfaqin defektin më të vogël zgjidhen dhe ICSI (mikroinjeksioni) kryhet me spermatozoidet me aftësi më të madhe fekondimi. Zbatimi i teknikës IMSI kërkon kohë më të gjatë dhe personel të trajnuar mirë krahasuar me ICSI konvencionale, dhe shkakton kosto më të lartë.

Kujt duhet t'i aplikohet IMSI?

• Veçanërisht në rastet me faktor mashkullor të rëndë,
• Në dështimet e përsëritura të IVF,
• Në rastet e infertilitetit me shkak të pashpjegueshëm,
• Në rastet kur përqindja e spermatozoideve normale në mostrën e spermës është e ulët, me aplikimin e IMSI mund të rriten normat e implantimit dhe të shtatzënisë, dhe të zvogëlohet rreziku i abortit të hershëm.

PGT (Diagnoza genetike para implantimit)

Te foshnja që zhvillohet në bark para lindjes, nëse ka apo jo një sëmundje genetike, mund të kuptohet me teste që kryhen që nga java e 12-të e shtatzënisë. Por kur këto teste tregojnë një sëmundje të rëndë, shtatzënia duhet ndërprerë në një fazë të avancuar (rreth muaji i 5-të). Kjo i shkakton çiftit lodhje psikologjike dhe fiziologjike. Ndërsa me diagnozën genetike para implantimit (PGT), embrionet me sëmundje genetike mund të identifikohen para se të transferohen te nëna, pra para se të fillojë shtatzënia, dhe zbulohen embrionet që mund të kenë një çrregullim numerik ose strukturor të kromozomeve. Kështu transferohen vetëm embrionet e shëndetshme. Edhe kur embrionet duken normale për nga forma dhe struktura, shtatzënia mund të mos zhvillohet, ose shtatzënia që zhvillohet mund të përfundojë me abort, për shkak të anomalive kromozomike. Në studimet e kryera, u gjet çrregullim kromozomal në embrionet me cilësi të mirë në masën 35–40%, dhe në embrionet me cilësi të dobët në masën deri në 85–90%. Specialisti i shëndetit riprodhues, këshilltari genetik dhe mjeku i sëmundjes përkatëse vlerësojnë nëse pacienti është i përshtatshëm për PGD. Çifti përgatitet për procedurën e fekondimit in vitro. Vezën e marrë nga nëna fekondohet në laborator me spermën e marrë nga babai. Kur embrionet e ndarë arrijnë fazën 6–10 qelizore në ditën e 3-të, fillimisht lihen në një lëng të veçantë të përgatitur për ndarjen e qelizave, pastaj nën mikroskop, me teknikën e duhur, nxirren 1–2 qeliza nga çdo embrion. Qelizat e marra me biopsi numërohen, dhe pasi të jetë kryer procesi i fiksimit, aplikohen teknika të veçanta si Hibridizimi Fluoreshent In Situ (FISH) ose Reaksioni Zinxhir i Polimerazës (PCR), që mundësojnë shqyrtimin e kromozomeve nën mikroskop. Embrionet që tregojnë një çrregullim numerik ose strukturor të kromozomeve identifikohen dhe ndahen; embrionet e shëndetshme transferohen në mitrën e nënës së ardhshme. Rastet ku do të zbatohet kjo teknikë duhet të përzgjidhen me shumë kujdes.

Sëmundjet genetike që mund të identifikohen me metodën PGT

• Sindromi i Daunit (monozomia 21)
• Trisomitë
• Talasemia (anemia mesdhetare),
• Anemia drepanocitare,
• Fibroza kistike,
• Sëmundja e Tay-Sachs,
• Hemofilia A dhe B,
• Retinitis pigmentosa,
• Sëmundja e Alportit,
• Mungesa e alfa-1 antitripsinës,
• Sindromi i X-it fragjil,
• Fenilketonuria,
• Epidermoliza bulloze,
• Distrofia muskulare e Duchenne-it,
• Distrofia miotonike,
• Anemia e Fanconit,
• Hidrocefalia e lidhur me X,
• Akondroplazia,
• Neurofibromatoza,
• Sëmundja e mospërputhjes së gjakut (Rh D),
• Sindromi i Marfanit,
• Sëmundja e Huntingtonit.

Metabolomika

Sot, embrionet që do të transferohen vlerësohen nën mikroskop dhe zgjidhet ai më cilësor sipas numrit të qelizave dhe karakteristikave formale, si dhe ai me probabilitetin më të lartë për t'u ngjitur në murin e mitrës. Por cilësia e mirë e embrionit nuk mjafton për të përcaktuar se embrionet janë normale nga pikëpamja genetike dhe metabolike. Vlerësimi nëse embrionet janë normale nga pikëpamja kromozomale (genetike) mund të bëhet vetëm duke shqyrtuar një ose dy qeliza të marra me biopsi, me metodën e diagnozës genetike para implantimit (PGT). Por për aplikimin e kësaj metode nevojiten arsye të vlefshme, si mosha e avancuar e nënës, bartja e një sëmundjeje genetike, humbjet e përsëritura të shtatzënisë, dështimet e procedurave të mëparshme, ose faktori i rëndë mashkullor. Ashtu si nga analizat e gjakut dhe urinës përftohet informacion për gjendjen shëndetësore të një personi, mendohet se edhe për embrionet mund të merret informacion për gjendjen e tyre shëndetësore dhe të vlerësohet probabiliteti për të krijuar shtatzëni, duke shqyrtuar metabolizmin e tyre, pra cilat substanca konsumojnë nga mjedisi ushqyes dhe çfarë lëshojnë në mjedisin ku zhvillohen. Metoda e re e zhvilluar quhet “Metabolomics”. Kjo metodë, e cila nuk është futur ende në përdorim rutinë dhe përfitimi i së cilës është duke u hulumtuar, nuk ka gjithashtu avantazhin e rritjes së aftësisë së embrionit për t'u ngjitur. Nuk është vërtetuar që rrit normat e shtatzënisë.

Ko-kultura endometriale (Mitra artificiale)

Te çiftet me dështime të përsëritura të IVF dhe me zhvillim të ngadalshëm dhe/ose cilësi të dobët të embrioneve të përsëritura, mendohet se kultivimi i embrioneve mbi qelizat endometriale të mitrës, të mbledhura dhe të ruajtura me ngrirje nga nëna e ardhshme para fillimit të trajtimit, mund të japë rezultat. Në ditën e 21-të të menstruacionit, merret një mostër e vogël indi nga mitra, ndahet në kushte laboratorike; me serumin e pacientit të marrë nga gjaku i vet, i inaktivizuar dhe i filtruar, krijohet mjedisi i kulturës dhe qelizat e nevojshme shumëzohen (zgjat 1–3 javë). Nëse trajtimi planifikohet për ciklin e radhës së menstruacionit, kultura vazhdon. Nëse planifikohet një datë më e largët, qelizat e zhvilluara ruhen me ngrirje. Më pas pacienti pranohet në trajtimin me IVF. Kur kryhet marrja e vezëve, mostrat e ruajtura të ngrira shkrihen. Krijohet një indi artificial i brendshëm i mitrës, të cilin e quajmë ko-kulturë. Pasi kryhet procedura IVF dhe vërehet fekondimi, embrionet e formuara rriten brenda këtij indi deri në transferim. Meqenëse kulturat e lëngjeve të zhvilluara në vitet e fundit krijojnë mjedis ushqyes shumë të përshtatshëm për embrionet, dhe meqenëse aplikimet e ko-kulturës nuk e rrisin shumë shansin e shtatzënisë, shumica e qendrave nuk e preferojnë këtë metodë që përmban rreziqe.

Vaksina me limfocite

Te infertiliteti me shkak të panjohur ose te humbjet e përsëritura të shtatzënisë, mendohet se mund të ketë një reagim alergjik refuzimi të nënës ndaj qelizave të babait. Për të trajtuar këtë reagim, limfocitet e marra nga babai dhe të përpunuara me procedura të ndryshme i aplikohen nënës me vaksinim. Efikasiteti i tij nuk është treguar në studime shkencore të kontrolluara.

Embrion Glue (Ngjitës)

Ky lëng kulture është lëngu që mban embrionet gjatë transferimit të tyre brenda mitrës, në kateter, dhe i mban embrionet gjatë transferimit brenda mitrës. Veçantia e këtij lëngu është se përmban në përqindje të lartë (0.5 mg/ml) substancën me strukturë glikoproteinike të quajtur “hialuronan”. Hialuronani është një substancë që luan rol në lidhjet ndërqelizore dhe në përcaktimin e vetive të ndryshme specifike të indeve. Edhe pse nuk dihet qartë çfarë roli luan kjo substancë në marrëdhënien embrion–endometrium, mendohet se shtimi i saj në lëngun e kulturës së transferimit rrit shansin e ngjitjes së embrionit në mitër. Ngjitja e embrionit nuk është teknikë apo procedurë. Nuk mund të ngjitet në murin e brendshëm të mitrës një embrion që nuk ka potencial ngjitjeje, me anë të ndonjë procedure apo substance. Si rezultat i studimeve të kryera, nuk është arritur të vërtetohet që ky lëng rrit shansin e shtatzënisë.

IVM (Pjekja in vitro)

Vezët e papjekura të mbledhura pas përdorimit të shkurtër të barnave ose pa përdorur fare barna, pjeken në mjedis laboratorik brenda lëngjeve të veçanta të kulturës, dhe më pas kryhet mikroinjeksioni. Është një aplikim që mund të zbatohet te një grup i zgjedhur pacientësh, dhe suksesi i tij është i ulët krahasuar me trajtimet standarde të IVF.